原代細(xì)胞是從生物體內(nèi)直接分離并在體外培養(yǎng)的細(xì)胞。它們保持了從其來(lái)源組織或器官中獲取的特異性和生物學(xué)真實(shí)性。原代細(xì)胞通常具有有限的壽命，因?yàn)樗鼈冊(cè)谂囵B(yǎng)中會(huì)逐漸老化并終死亡。原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；

3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

4、 胎牛血清濃度為10%-80%；

5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；

7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋 巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；

5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。