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分光光度法基本原理

日期:2025-05-11 18:50
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摘要:
分光光度法基本原理
選擇吸收
  分光光度法物質(zhì)與光作用,具有選擇吸收的特性。有色物質(zhì)的顏色是該物質(zhì)與光作用產(chǎn)生的。即有色溶液所呈現(xiàn)的顏色是由于溶液中的物質(zhì)對光的選擇性吸收所致。由于不同的物質(zhì)其分子結(jié)構(gòu)不同,對不同波長光的吸收能力也不同,因此具有特征結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)集團(tuán),存在選擇吸收特性的*大實(shí)收波長,形成*大吸收峰,而產(chǎn)生特有的吸收光譜。即使是相同的物質(zhì)由于其含量不同,對光的吸收程度也不同。利用物質(zhì)所特有的吸收光譜來鑒別物質(zhì)的存在(定性分析),或利用物質(zhì)對一定波長光的吸收程度來測定物質(zhì)含量(定量分析)的方法,稱為分光光度法。 
定量依據(jù)
  朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據(jù)的基本原理。當(dāng)一束單色光(指路由一種顏色的光)通過一均勻的溶液時(shí),一部分被吸收,一部分透過。設(shè)入射光的強(qiáng)度為I0,透射光強(qiáng)度為I,則I/I0為透光度,用T表示。百分透過率為 T% = (I/I0)x100%
  研究表明:溶液對光的吸收程度即吸光度(A)(又稱消光度E、或光密度D)與透光度(T)呈負(fù)對數(shù)關(guān)系,即:A = - lgT
  分光光度法朗伯定律:有色溶液的吸光程度(A)與其液層厚度(光程)b成正比。當(dāng)溶液濃度不變時(shí),溶液的液層厚度越大,對光的吸收程度A值越大,則透光度越小。

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